فلورسانس در هیبریداسیون درجا (FISH) یک روش غربالگری ژنتیکی برای تشخیص DNA است (اسید دئوکسی ریبونوکلئیک) در هسته سلولهای منفرد.
این روش شامل استفاده از کاوشگرهای DNA خاص است که فقط می تواند اطلاعات مربوط به مناطق ژنومی که کاوشگر مورد استفاده برای آنها خاص است را فراهم کند.
موارد مصرف (مناطق کاربرد)
- سو of ظن در انحراف عددی کروموزومی:
- تشخیص ناهنجاری های کروموزومی عددی (به عنوان مثال ، تریزومی 21).
- برای تعیین کمی موزاییک برای انحرافات کروموزومی (به عنوان مثال ، در اولریش-سندرم ترنر).
- تشخیص ریز حذف (به عنوان مثال ، مونوسومی 22q11.2).
- تشخیص انحرافات کروموزومی (به عنوان مثال ، لوسمی لنفوسیتی مزمن (CLL) ، غیر هاچکین لنفوم).
نشانه های فوق توسط FISH بین فاز تجزیه و تحلیل می شود (برای جزئیات بیشتر به "روش آزمایشگاهی" مراجعه کنید).
روش
مواد مورد نیاز
- خون هپارین (حداقل 1-2 میلی لیتر)
آماده سازی بیمار
- لازم نیست
عوامل برهم زننده
- هیچ کدام مشخص نیست
روش آزمایشگاهی
فلورسانس در هیبریداسیون درجا (FISH) شامل استفاده از پروب های DNA دارای برچسب فلورسنت (پروب های FISH) است. اینها می توانند به یک محل DNA خاص در یک کروموزوم متصل شوند ، که به آن هیبریداسیون گفته می شود. پس از اتصال پروب با برچسب فلورسنت ، می توان با استفاده از میکروسکوپ ارزیابی را انجام داد. در این فرآیند ، تعداد سیگنالهای فلورسانس درون هسته های بین فاز تعیین می شود. علاوه بر این ، ارزیابی موقعیت (به عنوان مثال انتقال / تغییر مکان / به کروموزوم دیگر) در متافاز کروموزوم ممکن است.
هنگامی که فلورسنت متفاوت است رنگ می کند برای DNA های مختلف هدف در روش FISH استفاده می شود ، از آن به عنوان FISH چند رنگ یاد می شود. این امکان تجسم کامل ژنوم را فراهم می کند.
در برخی موارد ، پروب DNA مستقیماً با رنگ فلورسنت برچسب گذاری نشده است ، که به آن روش غیر مستقیم می گویند. در عوض ، برچسب آن با موادی مانند بیوتین یا دیگوکسیژنین. این روش پیچیده تر در نظر گرفته می شود اما حساسیت بیشتری دارد.
