تنها-ژن تجزیه و تحلیل یک روش آزمایش ژنتیکی هدفمند است.
در چارچوب این روش ، اگر یک بیماری ارثی مشکوک باشد ، که با یک تغییر واحد ایجاد می شود ژن، ژن مشکوک به علت بودن مورد بررسی قرار می گیرد. این نیز اغلب به طور معمول به عنوان بخشی از معاینات غربالگری انجام می شود.
موارد مصرف (مناطق کاربرد)
- تشخیص بیماری های یکنواخت به عنوان مثال فیبروز کیستیک.
روش
مواد مورد نیاز
- خون هپارین (حداقل 1-2 میلی لیتر)
آماده سازی بیمار
- لازم نیست
عوامل برهم زننده
- هیچ کدام مشخص نیست
روش آزمایشگاهی
اغلب اوقات ، روش تعیین توالی استفاده شده درژن تجزیه و تحلیل روش Sanger است ، همچنین سنتز خاتمه زنجیره ای نامیده می شود ، جایی که ابتدا به جداسازی DNA از خون. پس ، همه هیدروژن پیوندهایی که در خدمت نگه داشتن DNA دو رشته هستند ، شکسته می شوند. پس از گرم شدن در دمای 94-96 درجه سانتیگراد به مدت یک دقیقه ، دو رشته واحد وجود دارد. بعد ، به اصطلاح ترکیبی آغازگر رخ می دهد ، که به موجب آن یک آغازگر متصل می شود. این امر در حدود 60 درجه سانتی گراد انجام می شود. آغازگر یک الیگونوکلئوتید است (الیگومرهای متشکل از چند نوکلئوتید) که به عنوان یک نقطه شروع برای تکثیر DNA عمل می کند آنزیم ها مانند DNA پلیمراز. پس از ترکیبی آغازگر ، پسوند اتفاق می افتد که در آن دما به 72 درجه سانتی گراد افزایش می یابد. این اجازه می دهد تا آغازگر به DNA پلیمراز متصل شود (آنزیم ها که DNA را سنتز می کند). بعد از 30 سیکل به طور متوسط می توان روند را متوقف کرد.
تجزیه و تحلیل بیشتر توسط مویرگی الکتروفورز در توالی های خودکار. نتیجه را الکتروگرام می نامند. این رنگ های مختلف را نشان می دهد دنباله پایه.
با استفاده از این روش می توان جهش هایی را که فقط شامل یک پایه نوکلئیک درون ژن است ، که به آن جهش های نقطه ای نیز می شناسند ، تشخیص داد.
